Prinsip pembangunan untuk memilih garam buffering

Banyak kaedah fasa cecair usebuffer garam. Ia telah mendapati bahawa ramai orang tidak memahami penggunaan garam penampan dalam kaedah fasa cecair, jadi saya ingin berkongsi beberapa pandangan saya dan merangsang perbincangan.

1. Masa untuk memohon garam penampan

Jika sampel atau kekotoran utama yang akan dikaji dalam sampel mempunyai kecenderungan pengionan, kes-kes tertentu yang lain akan dibincangkan secara berasingan. Antara komponen dengan kecenderungan pengionan yang kuat, ada yang berada dalam keadaan molekul dan menggabungkan lebih baik dengan fasa pegun kromatografi fasa terbalik; Yang lain berada dalam keadaan ionik dan mempunyai pertalian yang lebih kuat untuk fasa mudah alih. Jika keadaan pengionan keadaan molekul dan keadaan ionik tidak dikawal dengan menggunakan garam penampan, ia adalah mudah untuk mempunyai puncak tailing dan bercabang. Dalam kes ini, sistem air dan organik tidak boleh digunakan sebagai fasa mudah alih, dan garam penampan dan sistem organik harus dipilih.

2. Kapasiti Buffering dan pemilihan pH garam penampan

Apabila menggunakanGaram elektrolit bufferedDalam fasa mudah alih, ia harus mempunyai kapasiti buffering tertentu. Jika mengurangkan jumlah suntikan sampel boleh meningkatkan bentuk puncak, ia mungkin menunjukkan bahawa kapasiti buffering larutan garam penampan tidak mencukupi. Kapasiti buffering larutan garam penampan berkaitan dengan kepekatan garam penampan dan nilai pH larutan garam penampan. Semakin tinggi kepekatan garam penampan, semakin kuat kapasiti buffering; Semakin dekat nilai pH larutan garam penampan adalah untuk pKa, semakin kuat kapasiti buffering. Secara amnya, nilai pH larutan garam penampan harus berada dalam lingkungan pKa ± 1. Untuk memastikan bahawa masa pengekalan utama Komponen tidak menyimpang sangat disebabkan oleh sedikit perubahan dalam nilai pH, nilai pH larutan garam penampan harus berada di luar julat sampel pKa ± 2.

3. Tamat tempoh panjang gelombang yang berkuat garam penampan

Setiap garam penampan mempunyai panjang gelombang tamat tempoh yang sama, dan panjang gelombang pengesanan kaedah tidak boleh kurang daripada panjang gelombang yang berkuat tamat tempoh penyelesaian garam penampan. Lebih dekat panjang gelombang pengesanan adalah untuk tempoh tamat tempoh panjang gelombang yang berkuat fasa mudah alih, semakin tinggi bunyi asas, semakin besar ralat nilai tindak balas, dan lebih kecil nilai tindak balas komponen dan sensitiviti.

4. Idea umum untuk penggunaan garam penampan

1. Kepekatan garam penampan biasanya 10-50 mmol/L. Kepekatan garam penampan harus dipilih mengikut sifat sampel dan jumlah suntikan untuk memenuhi kapasiti buffering yang diperlukan.

2. Bahagian maksimum dibenarkan fasa organik dalam elution kecerunan perlu ditentukan dengan mencampurkan eksperimen ofbuffer garam dan fasa organik. Garam penampan yang berbeza-perkadaran fasa organik perlu diambil untuk menentukan nisbah maksimum yang dibenarkan fasa organik, seperti 10:90, 20:80, 30:70, dan lain-lain. Garam penampan tidak boleh ditetapkan pada bahagian yang tinggi pada instrumen untuk mengelakkan pemendakan garam penampan daripada merosakkan instrumen tersebut.

3. Pilih garam penampan mengikut pelbagai kekangan seperti panjang gelombang tamat tempoh, nilai pH, dan kapasiti penimbalan, dan sebagainya. Sebagai contoh, jika panjang gelombang pengesanan adalah pada penyerapan akhir, fosfat biasanya akan dipilih.

4. Penyelesaian garam Commonbuffer termasuk: 0.1% asid fosforik/asid trifluoroacetic/asid asetik/larutan asid formik, 0.02-0. Penyelesaian fosfat dihydrogen kalium 05mol/L (diselaraskan kepada pH 3.0 dengan asid fosforik), dan sebagainya.

5. Untuk sebatian alkali, garam kalium lebih disukai, yang boleh menyekat kesan tailing dengan lebih baik.